Dynamická uživatelská příručka k softwaru pro normalizační řešení BIOSENSORS

Konkrétní pokyny ohledně excitačního výkonu a koncentrace normalizačního roztoku naleznete v tabulce 2 v uživatelské příručce. Všimněte si, že může být vyžadována určitá optimalizace na základě jednotlivých systémů.

Nejčastější dotazy

Otázka: Jak mám uložit helicity?
- A: Uchovávejte heliXcyto podle informací o skladování uvedených v uživatelské příručce. Zkontrolujte datum použitelnosti na štítku a použijte jej před uplynutím doby použitelnosti.
Otázka: Lze helicitu použít pro klinické účely?
- A: Ne, heliXcyto je určeno pouze pro výzkumné účely a nemělo by být používáno pro klinickou diagnostiku nebo léčbu.

Klíčové vlastnosti

Pro normalizaci fluorescenčních signálů na Spotu 1 a Spotu 2 heliXcyto čipu

Umožňuje správné odkazování na červené fluorescenční signály během měření RT-IC v reálném čase
Kompatibilní se všemi helicity čipy
Normalizační roztok (červené barvivo) obsahuje středně hydrofilní červené barvivo s jediným kladným čistým nábojem

Popis produktu

Číslo objednávky: NOR-Ra

Tabulka 1. Informace o obsahu a úložišti

Materiál	Víčko	Koncentrovaná akce	Množství	Skladování
Normalizace řešení-Ra	Pomerančový	10 uM	6x 100 ul	-20 °C

Pouze pro výzkumné použití.
Tento produkt má omezenou dobu použitelnosti, viz datum spotřeby na štítku.

Příprava

Použijte tento roztok pro normalizaci červeného barviva pro měření RT-IC v červeném kanálu (závisí na značení analytu).

Zřeďte 10 μM normalizační zásobní roztok na pracovní koncentraci pomocí běžícího pufru.
Koncentrace normalizačního roztoku by měla přibližně odpovídat koncentraci fluoroforu v nejvyšší koncentraci analytu, která má být měřena.

To lze vypočítat pomocí následující rovnice:

: Koncentrace normalizačního roztoku v požadované barvě
: Koncentrace barviva ve značeném roztoku analytu
: Nejvyšší koncentrace analytu, která by měla být měřena
: Stupeň značení (poměr barviva k analytu)

Naředěné roztoky lze skladovat při teplotě 2–8 °C po dobu až 7 dnů.

Poznámka k aplikaci

Při měření RT-IC by fluorescenční signál normalizačního roztoku měl být v podobném rozsahu jako nejvyšší signál pocházející z navázaného analytu (nezpracovaná data). Absolutní fluorescenční signál je závislý na koncentraci normalizačního roztoku a excitační síle použité při měření. Budicí výkon je třeba zvolit na základě následujících parametrů:

A. Koncentrace fluoroforu v roztoku analytu:
- Koncentrace fluoroforu závisí na koncentraci analytu použité při měření a také na stupni značení analytu. Pro vysoké DOL a vysoké koncentrace analytu může být nutné snížit excitační výkon.
b. Očekávaný vazebný signál:
- Vysoce exprimované cíle na buňce mohou vázat více molekul značeného analytu. V případě vysoce nadměrně exprimovaných cílů lze očekávat silný vazebný signál. Aby se předešlo uzavření závěrky, může být zváženo snížení budícího výkonu.
C. Typ čipu:
- Různé typy čipů mají různé fluorescenční pozadí. Čím větší pasti a čím více pastí na čipu, tím vyšší je signál pozadí. Proto mohou čipy L5 vyžadovat nižší budicí výkon než čipy M5.

Pro výchozí bod excitačního výkonu a normy. koncentrace roztoku, která má být použita v experimentu RT-IC, viz tabulka 2. Tabulka 2. Vztah koncentrace fluoroforu, koncentrace normalizačního roztoku a excitačního výkonu vhodného pro čip heliXcyto M5

Analytové barvivo konc. = analyt cons x DOL	Budicí síla	Roztok pro normalizaci koncentrace	Roztok pro normalizaci ředění
25 nM	0.5	25 nM	1:400
50 nM	0.3	50 nM	1:200
100 nM	0.2	100 nM	1:100
300 nM	0.1	300 nM	1:33
500 nM	0.08	500 nM	1:20
1 uM	0.05	1 uM	1:10
2.5 uM	0.02	2.5 uM	1:4

Poznámka: Tato tabulka je pro vás orientační. Konečný signál zaznamenaný ve helicitě však závisí na mnoha faktorech. Pro každý systém bude tedy vyžadována určitá optimalizace.

Kontakt

Dynamic Biosensors GmbH
Perchtinger Str. 8/10
81379 Mnichov
Německo
Dynamic Biosensors, Inc.
300 Trade Center, Suite 1400
Woburn, MA 01801
USA
Informace o objednávce order@dynamic-biosensors.com.
Technická podpora support@dynamic-biosensors.com.
www.dynamic-biosensors.com.
Nástroje a čipy jsou konstruovány a vyráběny v Německu.
Dynamic Biosensors, Inc. Všechna práva vyhrazena.
NOR-Ra v1.0
www.dynamic-biosensors.com.
Dynamic Biosensors GmbH & Inc.
NOR-Ra v1.0

Dokumenty / zdroje

Dynamický software BIOSENSORS Normalization Solution Software [pdfUživatelská příručka
NOR-Ra, Software pro normalizační řešení, Software pro řešení, Software

Reference

Uživatelská příručka

Dynamický software BIOSENSORS Normalization Solution Software

Specifikace